Wismutsulfit Agar Indikator Forex

CRITERION BISMUTH SULFITE AGAR VERWENDETE BENUTZUNG Hardy Diagnostics CRITERION Bismut Sulfit Agar ist ein hochselektives und differenziertes Medium. Es wird für die Isolierung von Salmonella-Arten, insbesondere S. typhi empfohlen. Aus Nahrungsmitteln und klinischen Proben. Dieses dehydrierte Kulturmedium ist ein Rohmaterial, das dazu bestimmt ist, bei der Herstellung von Zubereitungsmedienprodukten verwendet zu werden, die eine weitere Verarbeitung, zusätzliche Bestandteile oder Ergänzungen erfordern. Salmonellose ist nach wie vor ein wichtiges Thema der öffentlichen Gesundheit in den Vereinigten Staaten und weltweit. Trotz der Bemühungen, das Auftreten von Salmonella bei domestizierten Tieren zu kontrollieren, sind Salmonellen primäre Erreger von vielen Tieren (z. B. Geflügel, Kühe, Schweine, Reptilien usw.) und sind die Hauptquelle für nicht-typhöse Salmonellosen beim Menschen. (12) Menschliche Infektionen mit Salmonellen werden am häufigsten durch Aufnahme von fäkal kontaminierten Lebensmitteln, Wasser oder Milch verursacht. Eine unsachgemäße Handhabung von Geflügelprodukten ist oftmals die Ursache der Salmonellen-verwandten Gastroenteritis, wobei etwa die Hälfte der Salmonellose-Epidemien durch verunreinigtes Geflügel und Geflügelprodukte verursacht wird. Nicht-Typhus Salmonellen verursachen in der Regel eine Darminfektion, begleitet von Durchfall, Fieber und Bauchkrämpfen. In der Regel ist es mild und selbstlimitierend, oft eine Woche oder länger dauern. Alle Altersgruppen sind betroffen, mit der höchsten Inzidenz bei Säuglingen. (2,5,12) Typhus, verursacht durch S. typhi. Ist eine ernste Blutkreislaufinfektion, die in den Entwicklungsländern üblich ist. Es ist selten in den Vereinigten Staaten und die meisten gemeldeten Fälle sind im Zusammenhang mit ausländischen Reisen. Typhus typisch präsentiert anhaltende, schwächende hohes Fieber und Kopfschmerzen, ohne Durchfall. Es gibt eine lange und sehr variable Inkubationszeit (1 bis 6 Wochen). Sie wird durch Personenkontakt oder durch fäkal kontaminierte Lebensmittel und Wasser übertragen. (2) Die Menschen sind das einzige bekannte Reservoir für S. typhi. (5) Bei der Lebensmitteluntersuchung wird Bismuth-Sulfit-Agar als eines der hochselektiven Medien zur Isolierung von Salmonella-Spezies aus Milchprodukten spezifiziert. Rohmilch wurde mit menschlichen Ausbrüchen mit Salmonellen assoziiert. Salmonellen-Infektion bei Milchvieh sind häufig und Ausbrüche von Rinder-Salmonellose wurden berichtet. Milchvieh kann Salmonellen-Infektion aus einer Vielzahl von Quellen, einschließlich verunreinigte Futter oder Wasser zu erwerben. Salmonellen sind nicht in der Lage, die Pasteurisierung zu überleben. Daher wird seine Anwesenheit in pasteurisierter Milch gewöhnlich durch eine unzureichende Verarbeitung oder eine nach der Pasteurisierung verursachte Verunreinigung verursacht. (12) Bismutsulfit-Agar ist aufgrund der Anwesenheit von Inhibitoren selektiv und ist auf der Basis der Hydrogensulfidproduktion differentiell. (13) Rindfleisch-Extrakt und Peptone liefern Stickstoff, Vitamine und Mineralien. Dextrose ist eine Energiequelle. Bismutsulfit und brillantes Grün sind selektive Mittel, die die meisten kommensalen gram-positiven und gramnegativen Organismen außer Salmonella-Spezies und einigen Shigella-Spezies hemmen. Ferrosulfat ist ein Indikator für die Herstellung von Schwefelwasserstoff, der auftritt, wenn das von Salmonella hergestellte H 2 S mit dem Eisensalz reagiert. Diese Reaktion bewirkt eine schwarze oder grüne metallische Kolonie und einen braunen oder schwarzen Niederschlag. (2) Grammgewicht pro Liter: Endwert pH 7,5 - 0,2 bei 25ordmC. Justiert und ergänzt, soweit erforderlich, um Leistungskriterien zu erfüllen. LAGERUNG UND HALTBARKEIT Die verschlossene Flasche (n), die dehydriertes Kulturmedium enthält, bei 2-30ordmC aufbewahren. Dehydriertes Kulturmedium ist sehr hygroskopisch. Deckel fest verschlossen halten. Schützen Sie dehydrierte Kulturmedien vor Feuchtigkeit und Licht. Das dehydrierte Kulturmedium sollte weggeworfen werden, wenn es nicht frei fließt oder wenn sich die Farbe von ihrem ursprünglichen hellgrünen Beige verändert hat. Bewahren Sie die vorbereiteten Kulturmedien bei 2-8ordmC. VORSICHTSMASSNAHMEN VORBEREITUNG FÜR DEHYDRIERTE KULTURMEDIEN 1. Suspendieren Sie 52,0 g des dehydrierten Kulturmediums in 1 Liter destilliertem oder deionisiertem Wasser. Rühren Sie, um gründlich zu mischen. 2. Erhitzen bis zum Kochen vollständig auflösen, ca. 1 Minute. Nicht überhitzen. 3. Nicht autoklavieren. 4. Kühlen Sie auf 45-50ordmC ab. 5. Vor dem Gießen in Petrischalen gründlich mischen. Verwenden Sie gegossene Platten am selben Tag. VERFAHREN UND DURCHFÜHRUNG DER ERGEBNISSE Informationen zu Verfahren und Interpretation der Ergebnisse finden Sie in den aufgeführten Literaturstellen. BESCHRÄNKUNGEN Die Inkubation von Bismutsulfit-Agarplatten bei höheren Temperaturen (d. h. 43ordmC) kann zu kleinen, atypischen Salmonella-Kolonien führen. In einigen Fällen werden höhere Temperaturen auch die Methodenempfindlichkeit verringern sowie signifikant niedrigere Ausbeuten zeigen. (6) Typische S. typhi-Kolonien entwickeln sich gewöhnlich innerhalb von 24 Stunden, jedoch sollten alle Platten 48 Stunden lang inkubiert werden, um das Wachstum aller Typhus-Stämme zu ermöglichen. (13) Bismutsulfit-Agarplatten sollten nicht länger als 2 Tage gekühlt (2-8ordmC) gelagert werden. Nach 3 Tagen Lagerung gibt es eine Verringerung der Medienselektivität und verringert die Anzahl der gewonnenen Salmonellen. Es wird empfohlen, Bismuth-Sulfit-Agar-Platten an dem zubereiteten Tag zu verwenden. (13) Die meisten Shigella-Arten werden gewöhnlich auf Bismut-Sulfit-Agar gehemmt, S. flexneri und S. sonnei können jedoch ein Wachstum zeigen. (13) S. typhi und S. arizonae sind die einzigen enterischen Organismen, die typische braune Zonen im Medium zeigen, obwohl S. Arizonae ist gehemmt. Andere Mitglieder der Enterobacteriaceae produzieren keine braunen Zonen. (13) Es ist wichtig, für gut isolierte Kolonien in schweren Wachstumsbereichen zu streifen. S. typhi erscheint hellgrün und könnte als negatives Wachstum für S. typhi interpretiert werden. (13) Kolonien auf Bismut-Sulfit-Agar können mit anderen lebensfähigen Organismen kontaminiert sein, daher sollten isolierte Kolonien auf einem weniger selektiven Medium (d. h. MacConkey-Agar) subkultiviert werden. (13) ERFORDERLICHE MATERIALIEN, ABER NICHT BEREITGESTELLT Standardmäßige mikrobiologische Lieferungen und Geräte wie Autoklaven, Verbrennungsanlagen und Inkubatoren usw. sind nicht vorgesehen. QUALITÄTSKONTROLLE PHYSIKALISCHE AUSSEHUNGSKRITERIEN Bismutsulfit-Agar-Pulver sollte homogen, frei fließend und hellgrünlich-beigefarben erscheinen. Die vorbereiteten Medien sollten opak, mit einem flockigen Niederschlag und graugrüner Farbe erscheinen. REFERENZEN 1. Anderson, N. L. Et al. Cumitech 3B Qualitätssysteme im Klinischen Labor für Mikrobiologie, Koord. WIE. Weissfeld. Amerikanische Gesellschaft für Mikrobiologie, Washington, D. C. 2. Jorgensen. Et al. Handbuch der klinischen Mikrobiologie, Amerikanische Gesellschaft für Mikrobiologie, Washington, D. C. 3. Tille, P. et al. Bailey und Scotts Diagnostic Microbiology, C. V. Mosby-Gesellschaft, St. Louis, MO. 4. Isenberg, H. D. Clinical Microbiology Procedures Handbook, Bd. I, II Amp. III. Amerikanische Gesellschaft für Mikrobiologie, Washington, D. C. Koneman, E. W. et al. Farbatlas und Lehrbuch der diagnostischen Mikrobiologie, J. B. Lippincott Company, Philadelphia, PA. 6. APHA Technischer Ausschuss für Mikrobiologische Methoden für Lebensmittel. Kompendium von Methoden für die mikrobiologische Untersuchung von Lebensmitteln, APHA, Washington, D. C. 7. U. S. Food and Drug Administration. Bakteriologisches Analytisches Handbuch. AOAC, Arlington, VA. Fda. govFoodFoodScienceForschungLaboratoryMethodsucm2006949.htm. 8. Atlas, R. M. 1997. Handbuch der mikrobiologischen Medien. 2. Aufl. CRC Press, Inc. Boca Raton, Florida, erhältlich. 9. MacFaddin, J. F. Biochemische Tests zur Identifizierung von medizinischen Bakterien,. Lipincott Williams Wilkins, Philadelphia, PA. 10. Wilson, James W. und E. M.MV. Blair. 1926. Eine Kombination aus Bismut und Natriumsulfit, die ein Anreicherungs - und Selektionsmedium für die Typhus-Paratyphus-Gruppen von Bakterien liefert. Das Journal of Pathology and Bacteriology 29: 310-311. 11. Hajna, A. A. Und S. R. Damon. 1956. Neue Anreicherungs - und Beschichtungsmedien zur Isolierung von Salmonella - und Shigella-Organismen. Angewandte Mikrobiologie. 4: 341 & ndash; 345. 12. Marshall, R. T. Ph. D. 1993. Standardmethoden für die Untersuchung von Milchprodukten. 16. Aufl. American Public Health Association, Washington, D. C. MacFaddin, J. F. 1985. Medien für Isolierung, Kultivierung, Identifizierung, Erhaltung von Bakterien. Vol. I. Williams amp Wilkins, Baltimore, MD. ATCC ist ein eingetragenes Warenzeichen der American Type Culture Collection. Für diesen Organismus Andere Produkte zur Isolierung von Salmonellen. CM0201 Bismutsulfit-Agar (modifiziertes Wilson Blair-Medium) CM1091 ​​ONE-Brühe-Salmonella-Base CM1092 Brillanz-Salmonella-Agar CM1112-modifiziertes, halbfestes RAPPAPORT-VASSILIADIS-AGAR (ISO) QB0003 DuPont QUALICON-BAX-SYSTEM Q7 QB0608 BAX-SALMONELLA-Kit BO0201 PUFFIERTES PEPTONWASSER PO0164 XLD MEDIUM PO0171 BRILLIANT GRÜN AGAR (MODIFIZIERT) PO1132 XLD AGAR (EP, USP, JP, BP) PO5098 BRILLIANZ SALMONELLA AGAR Dehydrierte Kulturmedien Nach Bedarf zur Erfüllung von Leistungsstandards angepasst. Anleitung Suspension 20 g in 500 ml destilliertem Wasser in einem 1-Liter-Kolben. Hitze sanft mit häufigem Rühren, bis das Medium gerade beginnt zu kochen und für 30 Sekunden köcheln lassen, um den Agar aufzulösen. Kühlen Sie auf 50-55degC ab, mischen Sie gut, um Suspension zu verteilen und dicke Platten (25 ml Medium pro Platte) zu gießen. Lassen Sie das Medium mit der Schale unbedeckt verfestigen. Größere Volumina können hergestellt werden, wenn große Sorgfalt angewandt wird und ausreichend Kopfraum zur Verfügung gestellt wird. Trocknen Sie die Platten vor dem Gebrauch, aber achten Sie darauf, eine Übertrocknung zu vermeiden. Richtig vorbereitete Platten sollten eine glatte, cremeartige Opazität mit einer hellen Strohfarbe haben. Es sollte keine Sedimentation des Indikators vorhanden sein. NICHT ÜBERHITZEN - DO NOT AUTOCLAVE Beschreibung Bismut Sulphite Agar ist eine Modifikation des ursprünglichen Wilson und Blair 1 selektiven Mediums für die Isolierung und vorläufige Identifizierung von Salmonella typhi und anderen Salmonellen aus pathologischem Material, Abwasser, Wasserversorgung, Lebensmitteln und anderen Produkten, von denen vermutet wird Die diese Pathogene enthalten. In diesem Medium wirkt das frisch gefällte Wismutsulfit zusammen mit glänzendem Grün als selektivem Mittel, indem es das Wachstum von Coliformen unterdrückt, während das Wachstum von Salmonellen ermöglicht wird. Schwefelverbindungen stellen ein Substrat für die Herstellung von Schwefelwasserstoff bereit, während die Metallsalze im Medium die Kolonie färben und das Medium schwarz oder braun in Gegenwart von Schwefelwasserstoff umgeben. Atypische Kolonien können auftreten, wenn das Medium stark mit organischer Substanz inokuliert wird. Eine solche Situation kann verhindert werden, indem die Probe in sterile Kochsalzlösung suspendiert wird und der Überstand für die Inokulation verwendet wird. Das frisch zubereitete Medium hat eine starke Hemmwirkung 2 und ist für stark kontaminierte Proben geeignet. Die Lagerung der gegossenen Platten bei 4 ° C für 3 Tage bewirkt, daß das Medium die Farbe auf Grün wechselt, was es weniger selektiv macht, wenn kleine Mengen von Salmonellen zurückgewonnen werden. 3. Für die Salmonella-Typhi-Wiedergewinnung wird jedoch die letztere Technik nicht empfohlen. Wenn erwartet wird, dass die Anzahl der Salmonellen klein ist, können Anreicherungsverfahren angewendet werden. Die Verwendung dieses Mediums wird von mehreren Behörden 5,6,7 befürwortet. Technik Bismut Sulfit-Agar kann in Verbindung mit anderen selektiven enterischen Agaren für die Isolierung von Salmonellen durch direkte Plattierung oder aus Anreicherungsmedien 8 verwendet werden. Somit kann das folgende Schema angenommen werden. Inokulieren Sie direkt auf Bismut-Sulfit-Agar und eine oder mehrere der folgenden Substanzen: Desoxycholat-Citrat-Agar CM0227 oder DCLS-Agar CM0393 XLD-Agar CM0469 Brillantes grünes Agar CM0329 MacConkey-Agar Nr. 3 CM0115 Gleichzeitig wird eine Anreicherungsbrühe, wie die Selenitbruderbasis CM0395, inokuliert Natrium-Biselenit LP0121, Mueller-Kauffmann Tetrathionat-Brühe CM0343 oder Mueller-Kauffmann Tetrathionat-Novobiocin-Brühe (MKTT-n) CM1048. Subkultur auf Bismut-Sulfit-Agar und jedes andere selektive Medium nach 12-18 Stunden Inkubation. Untersuchen Sie die Platten nach 18-stündiger Inkubation und subkulturverdächtigen Kolonien auf Identifikationsmedien, z. B. Kligler Iron Agar CM0033. Alle negativen Platten sollten 48 Stunden lang inkubiert werden. Salmonella typhi Aussehen Schwarze Kaninchen-Eyersquo-Kolonien mit einer schwarzen Zone und metallischem Schimmer um die Kolonie nach 18 Stunden. Gleichmäßig schwarz nach 48 Stunden Inkubation. Andere Salmonella-Arten Aussehen Variable Kolonie Aussehen nach 18 Stunden, können sie schwarz, grün oder klar und mucoid. Gleichmäßig schwarze Kolonien sind nach 48 Stunden zu sehen, oft mit weitverbreiteten Flecken des Mediums und einem ausgeprägten metallischen Glanz. Andere Organismen. z. B. Coliforme Bakterien, Serratia, Proteus Spezies Erscheinungsbild In der Regel gehemmte, aber gelegentliche Stämme ergeben dumme grüne oder braune Kolonien ohne metallischen Glanz oder Färbung des umgebenden Mediums. Lagerbedingungen und Haltbarkeit Das dehydrierte Medium bei 10-30 ° C lagern und vor dem Verfalldatum auf dem Etikett ver - wenden. Beachten Sie die folgenden Bemerkungen: Aufgrund des Gehalts an reaktiven und hygroskopischen Stoffen verschlechtert sich das dehydrierte Bismut Sulfit-Agar schnell, wenn es der Atmosphäre ausgesetzt wird. Dies wird gewöhnlich durch Aggregation zu einer festen nicht brüchigen Masse und durch die Entwicklung einer braunen Färbung angezeigt. Medium rekonstituiert aus solchem ​​Material ist braun, wird nicht grün auf Lagerung und zeichnet sich durch Verlust von differentiellen und selektiven Eigenschaften. Aus diesem Grund sollte das Pulver an einem kühlen, trockenen Ort gelagert werden und nach Gebrauch sollte der Behälter ordnungsgemäß verschlossen werden. Vorbereitetes Medium Die vorbereiteten Platten sollten nicht länger als zwei Tage bei 2-8 ° C gelagert werden, danach brennt das grüne Oxid unter Bildung eines grünen Mediums, das einige Salmonellen hemmen kann. Aussehen Getrocknetes Medium: Hellgrün gefärbtes, frei fließendes Pulver Vorbereitetes Medium: blassgrün gefärbtes Gel Qualitätskontrolle Salmonella typhi sollte nur in einem Labor der Klasse 3 verwendet werden, nicht für Routineuntersuchungen oder in Lebensmittellaboratorien.